Е.Ф.Васильева, Г.И.Коляскина, С.Г.Кушнер, В.Г.Каледа, М.Я.Цуцульковская,

г. Москва, Россия

ВСТУПЛЕНИЕ.

В настоящее время на основании большого количества данных установлено, что между центральной нервной системой (ЦНС) и иммунной системой существует тесная взаимосвязь (1). Гормоны мозга, как теперь известно, стимулируют регуляторные процессы в иммунной системе. Подобно этому, медиаторы иммунной системы могут регулировать функции ЦНС. В последнее время в многочисленных исследованиях было изучено состояние иммунной системы при ряде психических заболеваний. У больных шизофренией были обнаружены иммунологические расстройства, в число которых входило изменение количества циркулирующих Т-клеток и их субпопуляций (2,3,6, 8), нарушение пролиферации стимулированных митогеном лимфоцитов (3,6), увеличение количества В-лимфоцитов и специфических противомозговых и антитимических антител (6). Результаты этих исследований свидетельствуют о том, что при шизофрении имеет место нарушение иммунных функций. Причины и механизмы изменений иммунной системы пока не известны. Одним из путей решения этой проблемы является оценка функциональной активности клеток, которые могут участвовать в развитии иммунного ответа.

Лимфоциты натуральные киллеры (НК) представляют собой отдельную субпопуляцию лимфоцитов, которые способны убивать опухолевые клетки без предварительной сенсибилизации. Известно, что НК клетки играют важную роль в элиминации ин виво спонтанно растущей опухоли и в защите организма от заболеваний вирусной и микробной этиологии. Кроме того, установлено, что НК клетки осуществляют иммунологический надзор в организме (4). В связи с этим целью наших исследований было изучение количества и цитотоксической активности (ЦА) НК клеток у больных шизофренией (ШЗ) и шизоаффективным психозом (ШАП).

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

Было обследовано две группы больных: 31 больной ШЗ (12 - непрерывнотекущей параноидной формой и 19 приступообразно-прогредиентной формой) и 20 больных ШАП. Больные были классифицированы в соответствии с международной класификацией болезней - МКБ-10 (ШЗ - F 20.00 и F 20.01 и ШАП - F 25). Все обследованные были мужчины в возрасте 18-55 лет. Обследование больных проводили дважды: до начала курсового лечения психотропными препаратами и после его завершения. Контрольная группа включала 11 здоровых мужчин, соответствующих по возрасту больным. При анализе полученных данных учитывали следующие факторы: возраст больного в начале заболевания и на момент обследования, длительность заболевания, соотношение больных с низким и высоким уровнем ЦА и количеством НК.

Лимфоциты выделяли из периферической венозной крови в градиенте плотности фиколл-верографина. ЦА НК лимфоцитов оценивали по количеству недеградированной ³Н-РНК, которая остается в клетках мишенях (К-562) после контакта с НК клетками. Для постановки мембраноцитотоксического теста лимфоциты (2х10⁵) культивировали с клетками мишенями (10⁴), меченными ³Н-уридином в обогащенной среде RPMI-1640 с 5% эмбриональной телячьей сыворотки, глутамином (10 мкг/мл), гентамицином (10мкг/мл) и хепесом (1 мМ) в 96 луночных круглодонных панелях в течение 14-16 часов при температуре 37⁰С во влажной атмосфере с 5% СО_2.. Соотношение эффектор-мишень в каждой ячейке составляло 20:1. В контрольных ячейках находились только меченные клетки мишени. Радиоактивность мишеней (cpm) оценивали на жидкостном сцинцилляционном b-счетчике. Результаты выражали с помощью индекса цитотоксичности (ИЦ).

Относительное количество НК клеток определяли с помощью флуоресцеин-конъюгированных моноклональных антител CD-16 как процент от общего количества лимфоцитов.

Статистическую обработку результатов проводили с использованием t-критерия Стьюдента.

РЕЗУЛЬТАТЫ

Изучение ЦА НК в группах больных ШЗ и ШАП до начала лечения позволило выявить существенное снижение этого показателя у больных параноидной и приступообразно-прогредиентной ШЗ по сравнению с контролем (Р<0,01). Уровень ЦА НК лимфоцитов в группе больных ШАП достоверно не отличался от такового в контрольной группе здоровых (табл.1). Следует отметить, что количество НК клеток во всех обследованных группах больных до лечения не отличалось существенно от контроля (табл.1).

Таблица 1. Цитотоксическая активность и количество лимфоцитов натуральных киллеров у больных до лечения и в контроле.

Примечание: * - Р < 0,01 по сравнению с контролем.

Более детальный анализ цитотоксической активности и количества НК лимфоцитов, проведенный у больных ШЗ и ШАП в зависимости от возраста начала заболевания и возраста на момент обследования (до 30 лет и 30 и более лет), не выявил существенных различий между этими подгруппами больных ни по одному из исследуемых показателей.

Сопоставление ЦА и количества НК лимфоцитов у одних и тех же больных до и после лечения психотропными препаратами не выявило существенных отличий в значении этих иммунологических показателей во всех обследованных группах больных (рис.1).

Рис.1. Цитотоксическая активность (А) и количество (Б) лимфоцитов натуральных киллеров в группах больных до и после лечения.

Здесь и на рис. 2 незаштрихованные столбики - значение показателя до лечения; заштрихованные столбики - то же после лечения.

1 - Параноидная ШЗ; 2 - Приступообразно-прогредиентная ШЗ; 3 - Шизоаффективный психоз.

Вместе с тем анализ полученных данных, проведенный после разделения больных на подгруппы в зависимости от уровня ЦА НК до лечения (низкий и высокий уровни показателей по отношению к средним значениям в группах), показал, что при низком уровне ЦА НК клеток выявляется тенденция к его повышению после лечения при всех формах заболеваний (рис.2). При этом, наоборот, в подгруппах больных с высоким уровнем показателя выявлялась тенденция к его снижению после лечения.

Рис.2. Изменение уровня цитотоксической активности лимфоцитов натуральных киллеров после лечения у больных с низким уровнем активности до лечения.

Здесь обозначения те же, что и на рис.1.

Дальнейший анализ распределения больных в соответствии с низким и высоким уровнем ЦА НК лимфоцитов до лечения выявил в группах больных параноидной и приступообразно-прогредиентной ШЗ до лечения большой процент лиц с низким уровнем показателя и лишь небольшую часть лиц с высоким уровнем ЦА НК клеток. Напротив, у большинства больных ШАП до лечения обнаружен высокий уровень ЦА НК (рис.3).

Рис. 3. Соотношение лиц с низким и высоким уровнем цитотоксической активности лимфоцитов натуральных киллеров у больных шизофренией и шизоаффективным психозом до лечения.

Аналогичная картина выявлялась при обследовании этих больных после лечения психотропными препаратами.

Анализ клинико-иммунологических корреляций, проведенный с учетом длительности болезни, показал, что у больных параноидной ШЗ с длительностью болезни 10 и более лет уровень ЦА НК клеток до лечения был значительно ниже, чем в контроле (Р<0,05) и оставался таким же после лечения. При этом необходимо отметить, что процент больных с низким уровнем ЦА НК при параноидной ШЗ с длительностью болезни 10 и более лет возрастал после лечения. Соответственно этому процент лиц с высоким уровнем ЦА НК у этих же больных уменьшался. При этом у них наблюдалось повышение пропорции больных с высоким количеством НК клеток (рис.4).

А

Б

Рис.4. Соотношение больных с низким и высоким уровнем цитотоксической активности (А) и количеством (Б) лимфоцитов натуральных киллеров у больных параноидной шизофренией с длительностью болезни 10 и более лет до и после лечения.

Аналогичный анализ данных, проведенный у больных приступообразно-прогредиентной ШЗ показал, что уровень ЦА НК лимфоцитов у пациентов с длительностью болезни менее 10 лет до лечения не отличался от такового в общей группе больных этой формой ШЗ и после лечения оставался таким же. У больных же с длительностью болезни 10 и более лет значение этого показателя до лечения было выше, чем в общей группе больных, а после лечения значительно снижалось (Р<0,05, рис.5, А). При этом и соотношение лиц с низким и высоким уровнем ЦА НК существенно смещалось в сторону увеличения больных с низким уровнем показателя (рис.5, Б).

А

Б

Рис.5. Изменение цитотоксической активности (А) и соотношения лиц с низким и высоким уровней цитотоксической активности (Б) лимфоцитов натуральных киллеров у больных приступообразно-прогредиентной шизофренией с длительностью болезни 10 и более лет.

ОБСУЖДЕНИЕ

Таким образом, результаты проведенных исследований выявили снижение уровня ЦА НК при параноидной и приступообразно-прогредиентной формах ШЗ по сравнению с контролем. У больных ШАП уровень ЦА НК лимфоцитов не отличался статистически достоверно от такового в контрольной группе здоровых. Количество НК лимфоцитов в общих группах обследованных больных существенно не отличалось от контрольных цифр. Эти данные могут свидетельствовать о существовании патогенетических и, возможно, нозологических различий между двумя разновидностями эндогенного психоза. Кроме того, полученные результаты, а также дополнительные данные, выявившие до лечения при параноидной ШЗ с большой длительностью заболевания большой процент лиц с низким уровнем ЦА НК и увеличение этой пропорции после лечения, а также повышение у этих больных после лечения пропорции лиц с высоким количеством НК клеток, позволяют предположить, что часть НК клеток в этих случаях является незрелой, недифференцированной и не способной к цитотоксической активности.

Помимо этого, так как НК клетки активизируются различными лимфокинами, такими, как ИФ и ИЛ-2, снижение ЦА НК лимфоцитов у этих больных может быть отражением изменений активности этих субстанций при различных формах ШЗ (5,6). Вместе с тем, необходимо принимать во внимание возможность иммуномодулирующего действия психотропных препаратов, которые, как известно, при длительном применении в высоких дозах вызывают широкий спектр изменений в иммунной системе больных. Возможно, что эти изменения не нормализуются после того, как больные перестают принимать нейролептики.

Подтверждением этому в некоторой степени могут служить полученные нами результаты, выявившие при параноидной и приступообразно-прогредиентной ШЗ с большой длительностью заболевания повышение после лечения пропорции лиц с низким уровнем ЦА НК и, наоборот, снижение процента больных с высоким уровнем показателя. В этих случаях необходимо учитывать отсроченные эффекты нейролептиков, которые могут проявиться через длительное время после прекращения приема лекарств.

Представленные нами результаты можно считать предварительными. Для получения более полной информации о состоянии системы НК лимфоцитов у больных эндогенными психозами необходимо проведение расширенных исследований с изучением роли цитокинов и психотропных препаратов в изменении цитотоксичности и количества НК лимфоцитов при этой патологии.

ЛИТЕРАТУРА

1. Ader R. 1981. Psychoneuroimmunology. Academic Press, N.Y.

2. DeLisi L.E., Wyatt R.J. 1982. Psychopharmacology Bull., 18:158-163.

3. Ganguli R. et al. 1987. In: Viruses, Immunity and Mental Disorders (E.Kurstak, Z.Lipowski, P.Morozov, eds). Plenum Med.Book Company, N.Y., London, pp.321-326.

4. Herberman R.B., Ortaldo J.R. 1981. Science, 214:24-30.

5. Katila H. et al. 1989. Schiz. Res., 2:361-365.

6. Kolyaskina G. et al. 1991. In: Psychiatry and Biological Factors (E.Kurstak, ed.). Plenum Med. Book Company, N.Y., London, pp.169-180.

7. . Vartanian M., Kolyaskina G. 1987. Ann. N.Y. Acad.Sci., 469:660-668

8. Vartanian M. et al. 1978. In: Neurochemical and Immunological Components in Schizophrenia (D.Bergsma, A.L.Goldstein, eds.). Alan R.Liss, N.Y., p.339-364.